APOE-/-鼠左颈动脉结扎糖尿病模型目的:用APOE-/-鼠做左颈动脉结扎后注射STZ造糖尿病模型一、材料:动物:APOE-/-鼠;试剂:STZ、柠檬酸缓冲液;器械:眼科剪、眼科弯镊、眼科剪、手术剪、手术镊、6-0非吸收缝合线、4-0缝合线;二、颈动脉结扎模型建立:APOE-/-鼠做左颈动脉内颈支脉和外颈支脉结扎,其中外颈支脉结扎点需要保持甲状腺支脉于左颈动脉畅通;三、糖尿病模型建立:1、柠檬酸缓冲液配制:A液:柠檬酸g+双蒸水100ml;B液:柠檬酸三钠g+双蒸水100ml;A液与B液1:混合,调整PH为;2、STZ液配制:取STZ溶于柠檬酸缓冲液中,浓度为10mg/ml,um滤头过滤,避光,现配现用,10min内使用;术前禁食12h,100mg/kg腹腔注射SZT液,连续2d;四、检测:颈动脉组织HE。实验动物向小型化的发展趋势更有利于实验者的日常管理和实验操作。宝山区酒精肝疾病动物模型建模
SPF级SD雄性大鼠,体重约200~220g。使用脂多糖(LPS)诱导建立急性肺损伤模型。将大鼠放入固定盒中,用酒精檫拭大鼠尾静脉后,按压住尾静脉1/3处,注射器进针后回抽有血后注入LPS溶液(溶于生理盐水,给药剂量10mg/kg),从而建立内性急性肺损伤大鼠模型。对照组的大鼠尾静脉注射等体积的生理盐水。5.2模型鉴定及后续检测:5.2.1肺损伤后的目视观察:如下图所示,在急性肺损伤模型小鼠中,肺部有多处明显渗血,后有肉眼可见肺部大面积出血渗出,可以直观的反映肺损伤程度。上海C57小鼠疾病动物模型建模动物疾病模型广泛应用于疾病机制研究。
诱导模型实验动物:小鼠、豚鼠、大鼠造模试剂:烟雾、空气污染物及有害气体(PM2.5、臭氧、二氧化氮)、脂多糖、弹性蛋白酶获得方式:动物全身长时间放置在密闭容器内,暴露于烟雾、空气污染物或者有害气体;气管内滴注脂多糖或者弹性蛋白酶。模型特点:烟雾、空气污染物或者有害气体诱导模型使用的物质、暴露的剂量、频次和时间不尽相同;脂多糖造模时间短,可用来模拟急性加重反应,但不能反应慢性病变的过程,通常需要和其他造模方法联用。2.基因模型实验动物:α1-抗胰蛋白酶等基因敲除小鼠获得方式:直接购买模型特点:α1-抗胰蛋白酶基因敲除小鼠是经典的COPD转基因模型,更准确地理解易感基因的致病机制。
3)基因/蛋白质表达定性或定量检测在进行分子检测的过程中,保持核酸和蛋白质的完整性至关重要,因此在取样过程中,应尽量避免核酸及蛋白质的降解。如不注意采样过程,将会导致样本中的核酸及蛋白质的无差别降解,严重影响后续分子检测结果。在条件允许的情况下,组织样本在离体后应立刻装入冻存管内,并立即放入液氮中进行冷冻。在RNA提取样本的保存过程中,可以选择非冷冻型RNA保存液或Trizol试剂进行RNA酶的抑制。针对蛋白质提取样本的保存,我们同样可以使用商品化的蛋白酶抑制剂进行短期处理。聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR)及免疫印迹(Westernblotting,WB),这两种实验手段是分子生物学检测中不可或缺的一部分,也是发表论文至关重要的分子检测数据。PCR主要用来对基因在基因组层面或转录层面的变化进行定性或定量检测,而WB则主要用来对某一蛋白质的表达进行定量检测。(4)转录组学、蛋白质组学及代谢组学检测随着检测水平及相关产业的不断发展,各类组学检测的降低,实验设计中也常常运用组学检测来提升实验设计的档次。在我们进行转录组学及蛋白质组学的检测过程中,同样是要首先确保目标RNA或蛋白质的片段完整性。这类动物疾病模型是指各种疾病共同性的一些病理变化过程的模型。
无论营养学和环境卫生学等方面,同一时期内很难在人身上取得一定数量的定性疾病材料。动物模型不仅在群体的数量上容易得到满足,而且可以通过投服一定剂量的药物或移植一定数量的**等方式,限定可变性,取得条件一致的模型材料。(五)可以简化实验操作和样品收集动物模型作为人类疾病的“缩影”,便于研究者按实验目的需要随时采取各种样品,甚至及时处死动物收集样本,这在临床是难以办到的。实验动物向小型化的发展趋势更有利于实验者的日常管理和实验操作。确定研究疾病目的了解影响疾病发生的内在与外在因素。青浦区成瘤疾病动物模型建模
动物模型作为人类疾病的缩影。宝山区酒精肝疾病动物模型建模
机械通气致肺损伤模型实验动物:兔子、大鼠获得方式:使用呼吸机,予以特定的通气模式(例如:大鼠接受20mL/Kg的潮气量、85次/min的呼吸频率2h)模型特点:急性肺损伤病理特征之一的透明膜常出现于大型的实验动物模型,而在大鼠或小鼠中很少出现,因此进行机械通气致肺损伤造模动物的选择需要谨慎。2.吸入性急性肺损伤模型实验动物:小鼠、大鼠、兔子造模试剂:烟雾、空气污染物及有害气体、脂多糖、活菌获得方式:通过吸入、气管内滴入或静脉滴注脂多糖、活菌、烟雾、有害化学试剂及气体等导致肺宝山区酒精肝疾病动物模型建模
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